两因素假说1972年，Mazur将1949年以来人们经过20多年的探索得到不同类型细胞的冷冻速率和细胞存活率的关系整理成曲线，说明每种细胞有一个最佳的冷却速率，如图3-1所示。由此，他认为造成冷冻损伤有两个独立的因素，一是过快的冷却形成胞内冰，造成膜的机械损伤，且冷却速率越快损伤也越大；二是慢速冷却时，胞外结冰而胞内尚未结冰，胞内的水分子会在水蒸气分压差推动下，渗透到胞外冻结，造成胞内外溶质浓缩，而产生溶质损伤，且冷却速率越慢，其损害也越大。综合上述两种因素的影响，得出如图3-2所示的总的效果曲线。如图32所示，对于某一种细胞，存在着某个最佳的冷却速率，对应有最大的存活率，过快或过慢的冷却速率，都会导致细胞的损伤增大，降低存活率。
